注射用生長激素主要是用于內源性生長激素缺乏所引起的兒童生長障礙,還適用于重度燒傷、生長激素缺乏癥等。臨床常用的重組人生長激素是通過基因工程、發(fā)酵工程生產的。圖1表示生長激素基因及其上的限制酶酶切位點,圖2表示質粒的結構示意圖。請回答下列問題。

(1)生產重組人生長激素時,利用PCR技術可獲取和擴增生長激素基因,擴增時需要引物,引物是指 一小段能與DNA模板鏈的部分堿基序列互補配對的短單鏈核酸一小段能與DNA模板鏈的部分堿基序列互補配對的短單鏈核酸;PCR的產物一般通過 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。
(2)已知DNA新鏈的延長方向是從5'→3',即沿模板鏈3'→5',若要擴增出生長激素基因并構建重組質粒,選擇的引物應是圖1中的 引物4和引物5引物4和引物5,理由是 引物4和引物5都位于模板鏈的3'端,可以復制出目的基因,且復制出的目的基因包含限制酶的切割位點引物4和引物5都位于模板鏈的3'端,可以復制出目的基因,且復制出的目的基因包含限制酶的切割位點。
(3)構建基因表達載體時,應選擇能識別圖2中 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ酶切位點的限制酶;所用載體除質粒以外,還可以是 λ噬菌體的衍生物、動植物病毒λ噬菌體的衍生物、動植物病毒(答出2點即可)。
(4)生產中,需將基因表達載體導入大腸桿菌后進行發(fā)酵。在發(fā)酵過程中,需要及時添加養(yǎng)分,并嚴格控制溫度、pH和溶氧量,原因是 環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖,而且會影響微生物代謝物的形成環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖,而且會影響微生物代謝物的形成。
【考點】基因工程的操作過程綜合;DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】一小段能與DNA模板鏈的部分堿基序列互補配對的短單鏈核酸;瓊脂糖凝膠電泳;引物4和引物5;引物4和引物5都位于模板鏈的3'端,可以復制出目的基因,且復制出的目的基因包含限制酶的切割位點;BamHⅠ和HindⅢ;λ噬菌體的衍生物、動植物病毒;環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖,而且會影響微生物代謝物的形成
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/18 8:0:8組卷:5引用:3難度:0.5
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