組織型纖溶酶原激活劑(tPA)是體內纖溶系統(tǒng)的生理性激動劑,也是一種新型的血栓溶解劑。生長激素(GH)可促進動物細胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳,在動物遺傳育種領域具有重要的功能。研究人員將GH基因導入轉tPA基因小鼠體內,獲得雙轉基因小鼠,以期提高小鼠乳汁中的tPA表達量?;卮鹣铝袉栴}:
(1)首先構建GH基因的表達載體,如圖所示:

GH基因上游的CMV能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結合,從而開啟轉錄過程;若GH基因是通過反轉錄得到的,則其與原基因的差異在于編碼區(qū)不包含 內含子內含子序列。
(2)對卵細胞供體和受體小鼠進行同期發(fā)情處理,還要給供體小鼠注射 促性腺激素促性腺激素,以 促進其超數排卵,然后與轉tPA基因公鼠交配。供體小鼠受精后,處死小鼠,獲取受精卵,將GH基因表達載體用 顯微注射顯微注射法導入受精卵中。將轉基因受精卵轉移至受體小鼠體內,待仔鼠出生。
(3)若要測定GH基因是否成功導入小鼠細胞核,取仔鼠的 尾部尾部(填“骨髓”“乳腺”或“尾部”)細胞檢測更加方便;若要對GH基因和tPA基因進行PCR擴增,需提取細胞基因組DNA,并設計 44種引物。
(4)雙轉基因小鼠長大后,選取健康個體,使其交配產仔后,收集其 乳汁乳汁測定其中的tPA蛋白含量。若要觀察GH基因是否促進了tPA基因的表達,還需測定 只轉tPA基因只轉tPA基因小鼠的tPA蛋白含量。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合酶;內含子;促性腺激素;顯微注射;尾部;4;乳汁;只轉tPA基因
【解答】
【點評】
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