生長素IAA是植物生長和發(fā)育的關鍵調節(jié)劑,其人工合成類似物2,4-D能夠強烈誘導生長素信號反應導致植物死亡,因此常被用作除草劑。農業(yè)生產中除草劑的使用常引發(fā)雜草對除草劑的抗性,據調查目前已知有包括東方大蒜芥在內的41種不同雜草已經進化出對除草劑的抗性。東方大蒜芥是一種農田惡性雜草,科研人員通過基因擴增測序的方式和轉基因技術探究了東方大蒜芥雜草種群中具有2,4-D抗性的機制,為培育抗除草劑作物提供了新的思路。
(1)研究者對具有2,4-D抗性(R)和2,4-D敏感(r)的東方大蒜芥植株進行了轉錄組分析,比較兩種植株細胞中的 mRNAmRNA,結果顯示植株具有2,4-D抗性與SoIAA2基因片段缺失有關。為進一步研究抗性植株中SoIAA2基因的缺失序列,研究者對抗性植株中的SoIAA2基因進行擴增后測序,體外擴增時需在緩沖溶液中加入的物質是 抗性植株中的SoIAA2基因、分別與兩條模板鏈結合的2種引物、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶抗性植株中的SoIAA2基因、分別與兩條模板鏈結合的2種引物、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶;合成的DNA新鏈的延伸溫度應控制在 72℃72℃左右。擴增產物電泳分離后才可放入測序儀中測序,電泳分離的原理是 DNA分子在一定pH下可帶上正電荷或負電荷,在電場作用下會向相反方向移動,且不同DNA分子大小不同,在電場作用下遷移速率不同DNA分子在一定pH下可帶上正電荷或負電荷,在電場作用下會向相反方向移動,且不同DNA分子大小不同,在電場作用下遷移速率不同。最終的結果顯示抗性植株中SoIAA2序列缺失了27bp(bp為堿基對)可表達為蛋白質的片段,突變?yōu)镾oIAA2Δ27基因,導致編碼的蛋白質缺失了 99個氨基酸。
(2)已知擬南芥不具有2,4-D抗性,為進一步檢測SoIAA2基因的缺失突變是否能賦予擬南芥2,4-D抗性,研究者構建了分別以SoIAA2和 SoIAA2Δ27SoIAA2Δ27為目的基因的表達載體,通過農桿菌轉化法分別轉至擬南芥受精卵中。使用農桿菌轉化法時目的基因必須插入 Ti質粒的T-DNATi質粒的T-DNA中才能保證其順利整合到擬南芥的染色體DNA上。分子水平上可通過 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術檢測目的基因是否翻譯成相應的蛋白質。最終通過個體生物學水平上的對照檢測發(fā)現(xiàn)SoIAA2基因突變?yōu)镾oIAA2Δ27基因能夠賦予擬南芥2,4-D的抗性。
【考點】遺傳信息的轉錄和翻譯.
【答案】mRNA;抗性植株中的SoIAA2基因、分別與兩條模板鏈結合的2種引物、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶;72℃;DNA分子在一定pH下可帶上正電荷或負電荷,在電場作用下會向相反方向移動,且不同DNA分子大小不同,在電場作用下遷移速率不同;9;SoIAA2Δ27;Ti質粒的T-DNA;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:5引用:1難度:0.6
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1.減數第一次分裂之前的間期需進行DNA的復制和有關蛋白質的合成?;卮鹣铝袉栴}:
(1)在DNA的復制過程中,DNA在
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