吳茱萸是一種中藥,其主要成分為吳茱萸堿(EVO)。為研究EVO對人胃癌細(xì)胞增殖的影響及作用機制,科研人員做了以下實驗。請回答問題:

(1)檢測EVO對胃癌細(xì)胞BGC-823增殖的影響。
①用含動物血清的DME/F-12培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BGC-823,動物血清的作用是提供生長因子(或補充培養(yǎng)基中動物細(xì)胞生長需要的未知營養(yǎng))提供生長因子(或補充培養(yǎng)基中動物細(xì)胞生長需要的未知營養(yǎng))。
②取出上述培養(yǎng)的細(xì)胞,加入胰蛋白酶制成單單細(xì)胞懸液,置于加入不同濃度EVO的多孔板中進(jìn)行培養(yǎng)。
③EVO對BGC-823細(xì)胞增殖影響的實驗結(jié)果如圖1.實驗結(jié)果表明吳茱萸堿抑制BGC-823細(xì)胞增殖;作用效果與作用時間和濃度呈正相關(guān)吳茱萸堿抑制BGC-823細(xì)胞增殖;作用效果與作用時間和濃度呈正相關(guān)。
(2)檢測EVO對BGC-823細(xì)胞周期的影響,結(jié)果如下表。
細(xì)胞周期中各期的細(xì)胞比例
組別 | G0/G1期(%) | S期(%) | G2/M期(%) |
對照組 | 42.62 | 17.65 | 23.37 |
EVO組 | 8.57 | 19.30 | 54.13 |
G2/M
G2/M
期。(3)檢測EVO對BGC-823細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,結(jié)果如圖2。
①根據(jù)上述實驗,可判斷
p53
p53
是細(xì)胞周期抑制蛋白,該蛋白能與細(xì)胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合,抑制其轉(zhuǎn)錄
轉(zhuǎn)錄
,從而抑制BGC-823細(xì)胞周期的運行。②細(xì)胞凋亡蛋白Caspase-3表達(dá)量
上升
上升
,該蛋白參與細(xì)胞的程序性
程序性
死亡過程。(4)綜上所述,推測EVO對人胃癌細(xì)胞的作用機制是
EVO通過促進(jìn)細(xì)胞周期抑制蛋白p53基因表達(dá),從而抑制細(xì)胞周期蛋白Cdc25C基因表達(dá),誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞阻滯于G2/M期,抑制胃癌細(xì)胞增殖;同時,EVO促進(jìn)細(xì)胞凋亡蛋白Caspase-3基因表達(dá),促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡
EVO通過促進(jìn)細(xì)胞周期抑制蛋白p53基因表達(dá),從而抑制細(xì)胞周期蛋白Cdc25C基因表達(dá),誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞阻滯于G2/M期,抑制胃癌細(xì)胞增殖;同時,EVO促進(jìn)細(xì)胞凋亡蛋白Caspase-3基因表達(dá),促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡
。【考點】細(xì)胞增殖的意義和細(xì)胞周期.
【答案】提供生長因子(或補充培養(yǎng)基中動物細(xì)胞生長需要的未知營養(yǎng));單;吳茱萸堿抑制BGC-823細(xì)胞增殖;作用效果與作用時間和濃度呈正相關(guān);G2/M;p53;轉(zhuǎn)錄;上升;程序性;EVO通過促進(jìn)細(xì)胞周期抑制蛋白p53基因表達(dá),從而抑制細(xì)胞周期蛋白Cdc25C基因表達(dá),誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞阻滯于G2/M期,抑制胃癌細(xì)胞增殖;同時,EVO促進(jìn)細(xì)胞凋亡蛋白Caspase-3基因表達(dá),促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:80引用:4難度:0.5
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1.細(xì)胞周期包括分裂間期(分為G1期、S期和G2期)和分裂期(M期)。如圖1標(biāo)注了甲動物腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞周期各階段的時長及DNA含量。圖2為用某抗癌藥物處理體外培養(yǎng)的該動物的癌細(xì)胞,24小時后用液式細(xì)胞儀(可根據(jù)細(xì)胞中DNA含量的不同對細(xì)胞分別計數(shù))的檢測結(jié)果。請回答下列問題:
(1)乙動物腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞周期時長為24 h,M期時長為1.9 h。若要在顯微鏡下觀察細(xì)胞有絲分裂過程中染色體形態(tài)的變化,選用
(2)乙圖中a峰和b峰之間的細(xì)胞正處于
(3)細(xì)胞癌變的根本原因是
(4)若用含放射性同位素的胸苷(DNA復(fù)制的原料之一)短期培養(yǎng)甲動物腸上皮細(xì)胞后,處于S期的細(xì)胞都會被標(biāo)記。洗脫含放射性同位素的胸苷,換用無放射性的新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng),定期檢測。預(yù)計最快約
(5)若向甲動物腸上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中加入過量胸苷,處于S期的細(xì)胞立刻被抑制,而處于其他時期的細(xì)胞不受影響。預(yù)計加入過量胸苷約發(fā)布:2025/1/15 8:0:2組卷:18引用:1難度:0.6 -
2.細(xì)胞從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期,以下為細(xì)胞周期的幾種檢測方法,分析回答相關(guān)問題。
(1)BrdU滲入測定細(xì)胞周期的方法:BrdU加入培養(yǎng)基后,可做為細(xì)胞DNA復(fù)制的原料。若 DNA-條單鏈滲入了BrdU時,染色體表現(xiàn)為深色,若DNA兩條單鏈均滲入了BrdU時,染 色體表現(xiàn)為淺色。細(xì)胞如果處于第一個周期的中期,則細(xì)胞中每條染色體均有
(2)同位素標(biāo)記法測定細(xì)胞周期:為測定某種細(xì)胞分裂的細(xì)胞周期,利用3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸短暫培養(yǎng)該種細(xì)胞一段時間后,處于S期的細(xì)胞都會被標(biāo)記。洗脫含放射性同位素的胸腺嘧啶脫氧核苷酸,再換用無放射性的新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng),定期檢測。不同間隔時間取樣,結(jié)果如圖1所示。
A:處于S期的細(xì)胞都被3H標(biāo)記;B:被標(biāo)記細(xì)胞最早進(jìn)入分裂期;C:50%分裂期細(xì)胞被標(biāo)證且在增加;D:50%分裂期細(xì)胞被標(biāo)記且在減少;E:出現(xiàn)被標(biāo)記細(xì)胞第二次進(jìn)入分裂期。則這種細(xì)胞的S期為
(3)流式細(xì)胞儀PI染色法:由于細(xì)胞周期各時相的DNA含量不同,PI可以與DNA結(jié)合,其熒光強度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量。因此,通過流式細(xì)胞儀PI染色法對細(xì)胞內(nèi)DNA含量送行檢測,可以將細(xì)胞周期各時期區(qū)分開來,獲得流式DNA含量圖進(jìn)而計算出細(xì)胞周期的值。
圖2為某二倍體生物(2N)細(xì)胞周期測定所得流式DNA含量圖,圖中b點對應(yīng)的細(xì)胞染色體數(shù)目為發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:52引用:1難度:0.5 -
3.細(xì)胞周期同步化是指利用一定方法使細(xì)胞群體處于同一細(xì)胞周期同一階段的過程。如圖是動物細(xì)胞周期同步化的方法之一,G1、S、G2、M期依次分別為10h、7h、3.5h、1.5h。使用DNA合成抑制劑選擇性阻斷S期,去除抑制劑后S期可繼續(xù)進(jìn)行,從而實現(xiàn)細(xì)胞周期同步化。下列敘述錯誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 0:0:1組卷:11引用:3難度:0.7
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