番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)是一類單鏈環(huán)狀DNA病毒,能引發(fā)番茄黃化曲葉病。檢測某番茄幼苗是否感染該病毒,實驗人員進行以下操作:
①分析PCR擴增結果;②從番茄幼苗組織樣本中提取DNA;③采集番茄幼苗葉片組織樣本;④利用PCR擴增DNA片段。
完成下列問題:
(1)正確的操作順序是 ③②④①③②④①(用數(shù)字序號表示)。
(2)操作②在番茄研磨液中加入2mol/L的氯化鈉,作用是 溶解DNA溶解DNA;研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)的作用是 抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解。
(3)操作④中使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶。PCR反應中每次循環(huán)可分為 變性變性、退火、延伸三步。
(4)PCR擴增得到的產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳后的結果如下:

注:M:DNA marker;1-4:空白對照、陰性對照、陽性對照、樣品
實驗中,DNA marker是一組已知長度和含量的標準DNA片段的混合物,起 參照參照作用。健康番茄幼苗的DNA是陰性對照組,TYLCV的DNATYLCV的DNA是陽性對照組。若想利用該樣品植株獲得無病毒的番茄幼苗,方法是 取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】③②④①;溶解DNA;抑制DNA酶活性,防止DNA被酶解;耐高溫的DNA聚合酶;變性;參照;TYLCV的DNA;取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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