M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?,F(xiàn)設計實驗,將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A,流程如圖所示。分析回答:

(1)過程①當在無菌無毒的環(huán)境中培養(yǎng)細胞至出現(xiàn) 接觸抑制接觸抑制現(xiàn)象時,需要對其進行分瓶處理。為保證環(huán)境無毒,應采取的措施是 對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理,通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝產(chǎn)物對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理,通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝產(chǎn)物。
(2)過程②為顯微操作去核過程,去除的“核”其實是 細胞核和第一極體細胞核和第一極體結構;與原生質(zhì)體融合相比,過程③特有的誘導融合方法是 用滅活的病毒誘導用滅活的病毒誘導。
(3)為獲得更多的克隆動物A.可在過程⑤胚胎移植前對胚胎進行分割,分割囊胚時,要注意 均等分割內(nèi)細胞團均等分割內(nèi)細胞團。
(4)鑒定轉基因動物:以免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合,篩選融合雜種細胞,制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路:用特定抗原刺激小鼠,然后取出已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出雜交瘤細胞,利用抗原—抗體雜交技術,檢測篩選出的雜交瘤細胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中已失活,如果能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中沒有失活用特定抗原刺激小鼠,然后取出已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出雜交瘤細胞,利用抗原—抗體雜交技術,檢測篩選出的雜交瘤細胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中已失活,如果能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中沒有失活。
【答案】接觸抑制;對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理,通常在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝產(chǎn)物;細胞核和第一極體;用滅活的病毒誘導;均等分割內(nèi)細胞團;用特定抗原刺激小鼠,然后取出已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出雜交瘤細胞,利用抗原—抗體雜交技術,檢測篩選出的雜交瘤細胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中已失活,如果能產(chǎn)生,說明M基因在克隆動物A中沒有失活
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:3引用:2難度:0.7