科研人員在水稻中發(fā)現一個同時受光和低氮誘導表達的基因OsDREBIC，通過轉基因手段探究了水稻的產量與該基因表達水平的關系。
（1）為構建OsDREB1C基因過度表達的水稻，科研人員將從水稻中克隆的OsDREB1C基因與外源高效啟動子連接，導入水稻基因組中。為檢測獲得的轉基因水稻中是否含有導入的OsDREBIC基因，同時避免內源OsDREB1C基因的干擾，在進行PCR擴增時，應該選擇的引物組合是 BB。
A．①+③
B．①+②
C．③+②
D．③+④
（2）OsDREB1C基因以B鏈為轉錄模板鏈，轉錄時mRNA自身的延伸方向為5′→3'。為了使該基因按照正確的方向與已被酶切的HT質粒連接，克隆該基因時在兩端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位點，該基因內部沒有這兩種酶切位點。圖2中酶切位點1和2所對應的酶依次是 BamHI和SmaIBamHI和SmaI。
（3）科研人員將所構建的OsDREBIC基因過度表達的水稻以及 敲除（低表達/不表達）該基因敲除（低表達/不表達）該基因水稻，均與 野生型野生型水稻進行對比。結果表明，OsDREBIC基因在水稻中的高表達，使其具有光合效率高效、氨肥高效、早熟的三重效果，由此可以看出基因與性狀 不是不是（填“是”或“不是”）一一對應的關系。該研究成果為全球糧食生產的重重困境帶來曙光。”
（4）科研工作者將過表達OsDREBIC基因和抗除草劑基因同時轉入大豆，獲得若干轉基因植株，已知某高產抗除草劑轉基因植株自交子一代中，高產抗除草劑44株、高產不抗除草劑21株、非高產抗除草劑22株，若給所有子一代植株噴施適量除草劑，讓存活植株自交，得到的子代群體中，非高產抗除草劑的比例為 1212。
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【答案】B；BamHI和SmaI；敲除（低表達/不表達）該基因；野生型；不是；
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【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/11/28 19:0:1組卷：49難度：0.5
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1．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：115難度：0.7 -
2．學習以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質的功能改變，引發(fā)相關疾病。約有10%～15%的人類基因相關遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關的基因編輯工具）通過一定的方式導入人體靶細胞內，達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達，都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現生理水平的基因表達，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關基因發(fā)生無義突變，產生終止密碼子UAG。研究者構建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設計的sup-tRNA表達載體（產生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導入細胞進行研究，發(fā)現與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進一步利用重組腺相關病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關治療中具有非常大的應用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關病毒與靶細胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內吞，進入細胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細胞的催化合成其互補DNA鏈，再經過過程產生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結論的依據是：。
（4）有文獻報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：28難度：0.6 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，自然界有些植物能產生幾丁質酶催化幾丁質水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入沒有抗性的植物體內，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結構，導致將其直接導入受體細胞中不能復制和表達。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質酶基因和質粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構建基因表達載體，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7