菊天牛是菊花的主要害蟲之一?？蒲腥藛T將抗蟲基因轉(zhuǎn)人菊花，培育出抗蟲菊花。如圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程，請據(jù)圖回答下列問題。

注：卡那霉素抗性基因（kan^R）作為標(biāo)記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。
（1）為了促進(jìn)土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用

Ca²⁺（或CaCl₂）

Ca²⁺（或CaCl₂）

處理土壤農(nóng)桿菌，使其處于

感受態(tài)

感受態(tài)

以便吸收重組質(zhì)粒。
（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠

感染菊花（或植物）細(xì)胞，并將T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞

感染菊花（或植物）細(xì)胞，并將T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞

的特點(diǎn)，使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞中，并插入菊花細(xì)胞的

染色體DNA

染色體DNA

上，最終形成轉(zhuǎn)基因植株。
（3）將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素和

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基中，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。
（4）可用

PCR

PCR

方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因。使用該方法時(shí)，需根據(jù)抗蟲基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)

2

2

個(gè)特異性引物，以轉(zhuǎn)基因菊花的DNA為模板進(jìn)行第一輪擴(kuò)增。
（5）將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示：

組別		死亡率%
實(shí)驗(yàn)組	轉(zhuǎn)基因植株1	60.00
	轉(zhuǎn)基因植株2	53.33
對照組		13.33

①對照組應(yīng)飼喂等量的

非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物

非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物

。
②據(jù)表分析，

實(shí)驗(yàn)組與對照組死亡率

實(shí)驗(yàn)組與對照組死亡率

差異顯著，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。