PCR是利用體內DNA復制的原理,進行生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術。請回答有關問題:

(1)PCR反應的基本步驟是變性、退火(復性)、延伸變性、退火(復性)、延伸。
(2)科學家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化5'→3'5'→3'方向的聚合反應,圖1表示細胞內染色體DNA的復制過程,有一條子鏈是先合成短的DNA片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,可推測參與以上過程的酶有解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶。在PCR過程中無岡崎片段形成的原因是細胞內是邊解旋邊復制,PCR復制過程是先完全解旋再復制細胞內是邊解旋邊復制,PCR復制過程是先完全解旋再復制。
(3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。某同學現(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術獲得以堿基“C”為末端(3′為堿基C)不同長度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進行電泳分離可得到33種不同長度的子鏈DNA片段。為使實驗順利進行,在PCR反應管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應的緩沖液等物質外,還需要加入下列哪組原料:BB。
A.dGTP、dATP、dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
(4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進行PCR擴增示意圖。據(jù)圖分析回答:
催化①過程的酶是逆轉錄酶逆轉錄酶;核酸酶H的作用是切除RNA(水解RNA)切除RNA(水解RNA);如果某RNA單鏈中一共有80個堿基,其中C有15個,A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個雙鏈DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為384個384個(以上過程不考慮引物)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定;目的基因的篩選與獲取.
【答案】變性、退火(復性)、延伸;5'→3';解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶;細胞內是邊解旋邊復制,PCR復制過程是先完全解旋再復制;3;B;逆轉錄酶;切除RNA(水解RNA);384個
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:22引用:1難度:0.6
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