人乳鐵蛋白（hLF）對細菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達載體構建及轉染研究，主要流程如圖，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關限制酶切點，neor為新霉素抗性基因，BLG基因為β乳球蛋白基因，GFP基因為綠色熒光蛋白基因，RT-PCR為反轉錄-聚合酶鏈反應，是將RNA的反轉錄和聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。請回答：
（1）過程①中，不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR，是因為 hLF基因在人肌肉細胞中不轉錄（表達）hLF基因在人肌肉細胞中不轉錄（表達）hLF基因。在RT-PCR過程中，加入的引物需在5'端添加SalⅠ和BamHⅠSalⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識別序列，以便于hLF基因插入pEB中。
（2）過程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳鐵蛋白基因 在山羊的乳腺細胞中表達在山羊的乳腺細胞中表達。過程③中，使用人工膜制成的脂質體將重組質粒導入受體細胞，依據(jù)的主要原理是 生物膜具有一定的流動性生物膜具有一定的流動性。
（3）將轉染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細胞應該是導入 pEB質?；騪EBL質粒pEB質?；騪EBL質粒的細胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞中 是否有綠色熒光是否有綠色熒光，以篩選出轉染成功的細胞。
（4）要獲得轉基因山羊，還需要將成功表達hLF基因的乳腺上皮細胞的細胞核移植到山羊去核的卵母去核的卵母細胞中，再借助 早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術孕育出羊羔。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】hLF基因在人肌肉細胞中不轉錄（表達）；SalⅠ和BamHⅠ；在山羊的乳腺細胞中表達；生物膜具有一定的流動性；pEB質粒或pEBL質粒；是否有綠色熒光；去核的卵母；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6