北極比目魚(yú)中有抗凍基因,下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖,請(qǐng)回答:

(1)利用過(guò)程①的方法構(gòu)建的基因文庫(kù)是 部分基因文庫(kù)(cDNA文庫(kù))部分基因文庫(kù)(cDNA文庫(kù)),除了從基因文庫(kù)中獲取目的基因以外,常用的獲取目的基因的方法還有 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和 人工合成人工合成。
(2)過(guò)程②中常需要使用限制酶和DNA連接酶,既能連接黏性末端又能連接平末端的DNA連接酶是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
(3)此題中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
(4)為使過(guò)程①獲取的目的基因在番茄細(xì)胞中能夠表達(dá),在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí),需要將目的基因插入 Ti質(zhì)粒的T-DNATi質(zhì)粒的T-DNA,并且需在目的基因的首端和尾端分別加入 啟動(dòng)子啟動(dòng)子,終止子終止子。
(5)要檢測(cè)番茄的DNA上是否插入抗凍基因,應(yīng)以 用放射性同位素標(biāo)記的目的基因用放射性同位素標(biāo)記的目的基因為探針,與番茄基因組DNA雜交;要確認(rèn)抗凍基因是否在轉(zhuǎn)基因番茄植株中正確表達(dá),應(yīng)通過(guò) 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物是否呈陽(yáng)性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】部分基因文庫(kù)(cDNA文庫(kù));利用PCR技術(shù)擴(kuò)增;人工合成;T4DNA連接酶;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;Ti質(zhì)粒的T-DNA;啟動(dòng)子;終止子;用放射性同位素標(biāo)記的目的基因;抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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