乙酰膽堿酯酶（AChE）是催化乙酰膽堿分解的水解酶，還能與有機磷農藥發(fā)生特異反應，在水質檢測中可用于有機磷農藥污染的快速檢測，乙酰膽堿酯酶對防治人類疾病、保護生態(tài)環(huán)境等方面的研究具有非常重要的意義?；卮鹣铝袉栴}：
（1）AChE的提取與純化：AChE廣泛存在于各種動物組織中，欲從動物肝臟中提取AChE，獲取新鮮肝臟后，必須立即處理或低溫保存，因為 乙酰膽堿酯酶很有可能失去活性乙酰膽堿酯酶很有可能失去活性。將豬肝切碎后，加低溫蒸餾水，為了防止血液過快的凝結，可適量加入 血液抗凝劑血液抗凝劑，在組織搗碎機中搗碎后離心，取 上清液上清液用于進一步分離和純化。
（2）AChE的基因克隆技術：利用PCR技術或RT-PCR技術（即利用逆轉錄和PCR技術）克隆AChE基因時，反應體系中均需要加入 耐高溫的TaqDNA聚合耐高溫的TaqDNA聚合酶，加入dNTP用于提供 原料和能量原料和能量。PCR產物經 凝膠電泳凝膠電泳技術純化后，可用 限制性內切核酸酶和DNA連接限制性內切核酸酶和DNA連接酶處理回收的DNA和克隆載體，獲得重組DNA分子，最終達到體內克隆AChE基因的目的。
（3）AChE的基因表達：若構建大腸桿菌表達系統(tǒng)，最好選擇 RT-PCRRT-PCR技術（填“PCR”或“RT-PCR”）獲取AChE基因．與克隆AChE基因相比，表達載體中還需要加入大腸桿菌的 啟動子和終止子啟動子和終止子等。在培養(yǎng)大腸桿菌時，常使用 LB液體LB液體培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)，用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法接種到平板上，更易獲得相應菌株。
（4）研究人員在進行某地水質檢測時，發(fā)現水樣能與AChE發(fā)生特異反應，若不及時治理，可能會造成水體 富營養(yǎng)化富營養(yǎng)化。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】乙酰膽堿酯酶很有可能失去活性；血液抗凝劑；上清液；耐高溫的TaqDNA聚合；原料和能量；凝膠電泳；限制性內切核酸酶和DNA連接；RT-PCR；啟動子和終止子；LB液體；稀釋涂布平板；富營養(yǎng)化
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：2難度：0.5
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）?？衫枚c突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：4引用：3難度：0.7