白細胞介素是人體重要的淋巴因子,具有免疫調節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學家將藥用蛋白轉向植物生產,如圖是將人的白細胞介素基因導入馬鈴薯中,培養(yǎng)生產白細胞介素的過程。(tsr為一種抗生素-硫鏈絲菌素的抗性基因)

(1)提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是PstⅠ和HindⅢPstⅠ和HindⅢ,不能使用限制酶SmaⅠ的原因是限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部,使用它會造成目的基因斷裂限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部,使用它會造成目的基因斷裂。
(2)除圖示方法外,也可從利用反轉錄反轉錄法構建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術大量擴增,需提供Taq酶和引物引物等。
(3)將目的基因導入馬鈴薯細胞常采用農桿菌轉化農桿菌轉化法,其原理是將目的基因導入Ti質粒上的T-DNAT-DNA。
(4)為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞,需要在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素硫鏈絲菌素。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達,可通過抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法進行分子水平的檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】PstⅠ和HindⅢ;限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部,使用它會造成目的基因斷裂;反轉錄;引物;農桿菌轉化;T-DNA;硫鏈絲菌素;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14難度:0.6
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