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人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值??蒲腥藛T通過生物工程技術獲得轉HSA 基因奶牛,并通過乳腺生物反應器生產HSA,其主要技術流程如圖1所示。請分析并回答下列問題:

(1)圖1中為獲取大量的去核卵母細胞,往往需對相應母牛使用
促性腺激素
促性腺激素
處理,使其超數排卵,收集并選取處在
減數第二次分裂中期
減數第二次分裂中期
時期的卵母細胞,通過顯微操作去除細胞核。供核的牛胎兒成纖維細胞通常選用傳代 10 代以內的細胞,其原因是
(10 代以內的細胞)能保持正常的二倍體核型
(10 代以內的細胞)能保持正常的二倍體核型

(2)胚胎移植時,為使代孕母牛能處于適合的生理狀態(tài),需要用激素對其進行
同期發(fā)情
同期發(fā)情
處理。為獲得更多轉基因母牛,可在胚胎移植前對胚胎進行
分割
分割

(3)SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是:提取牛胎兒成纖維細胞的DNA,經PCR 反應體系擴增SRY基因(Y 染色體上特有的性別決定基因)片段,然后對擴增產物進行檢測。
①PCR反應體系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
、緩沖液等。根據SRY基因序列設計的引物長度一般為20~24個核苷酸,其不宜過短的原因主要是
防止引物隨機結合(或引物的特異性差)
防止引物隨機結合(或引物的特異性差)
,兩種引物中G+C的含量相差不宜過大,原因主要是
G+C的含量差別過大,低溫復性溫度難于統(tǒng)一
G+C的含量差別過大,低溫復性溫度難于統(tǒng)一
。
②PCR 一般要經歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性、
復性
復性
和延伸三步。在循環(huán)之前,常要進行一次預變性,其目的是
以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率
以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率
。
③細胞核內DNA的復制過程如圖2 所示,其中有一條子鏈是先合成短的脫氧核苷酸鏈片段(稱為岡崎片段),再形成較長的分子,而在PCR過程中無岡崎片段形成的原因是
DNA子鏈的延長方向只能是5'→3',細胞內是邊解旋邊復制,PCR中復制過程是先完全解旋再復制
DNA子鏈的延長方向只能是5'→3',細胞內是邊解旋邊復制,PCR中復制過程是先完全解旋再復制
。
④若擴增產物含大量SRY基因片段,則該種牛胎兒成纖維細胞
不能
不能
(填“能”或“不能”)用作技術流程中轉化過程的受體細胞。

【答案】促性腺激素;減數第二次分裂中期;(10 代以內的細胞)能保持正常的二倍體核型;同期發(fā)情;分割;dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP);防止引物隨機結合(或引物的特異性差);G+C的含量差別過大,低溫復性溫度難于統(tǒng)一;復性;以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率;DNA子鏈的延長方向只能是5'→3',細胞內是邊解旋邊復制,PCR中復制過程是先完全解旋再復制;不能
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:60引用:2難度:0.6
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    (2)為了某些需要,需對胚胎的性別進行鑒定。目前最有效最準確的方法是SRY-PCR法,操作的基本程序是:從被測的囊胚中取出幾個
     
    (填“滋養(yǎng)層”或“內細胞團”)細胞,提取DNA;然后用位于Y染色體上的性別決定基因(即SRY基因)的一段堿基作
     
    ,以
     
    為模板進行PCR擴增;最后與SRY特異性探針出現陰性反應者,胚胎為
     
    性。
    (3)設計試管嬰兒、克隆人等都是引起人們廣泛爭論的問題。我國不反對治療性克隆,即可利用人體細胞核移植等技術治療人類疾病,在去除卵母細胞的細胞核時,可用微型吸管把位于
     
     
    之間的第一極體一并吸出。

    發(fā)布:2024/11/5 8:0:2組卷:65引用:1難度:0.8
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