黑曲霉會導(dǎo)致儲存的果蔬與谷物腐爛。因此抑制有害霉菌的生長成為食品保藏及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的首要任務(wù)?？茖W(xué)家篩選出若干株對黑曲霉有較強(qiáng)抑制作用的菌株，并對其進(jìn)行初步研究?；卮鹣铝袉栴}
（1）若要對黑曲霉抑菌菌株進(jìn)行篩選與純化，可利用 液體液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基對其進(jìn)行富集培養(yǎng)，然后對菌液進(jìn)行 梯度稀釋梯度稀釋，再涂布到黑曲霉生長良好的培養(yǎng)基上，觀察是否出現(xiàn) 抑菌圈抑菌圈，然后再將出現(xiàn)抑菌能力最強(qiáng)的菌株進(jìn)行 篩選篩選純化培養(yǎng)。
（2）利用黑曲霉為病原指示菌，初篩出了形態(tài)差異較大的14株對黑曲霉有抑制作用的菌株，將其編號為LG-1～LG-14，如圖1所示，應(yīng)挑選圖中的 LG-13LG-13菌株。但實踐發(fā)現(xiàn)，上述菌株的抑菌效果還不太理想，若想獲得抑菌作用更好的菌株，還可采用 誘變育種或基因工程誘變育種或基因工程育種方法。
（3）現(xiàn)需要將某毒性基因（pobA基因）的啟動子序列（dmp）插入圖2所示表達(dá)載體的B區(qū)對抑菌菌株進(jìn)行改造，從而提高抑菌菌株的抑菌效果。圖3顯示了啟動子dmp內(nèi)部的酶切位點，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，應(yīng)在其C、D兩端添加兩種限制酶 XhoⅠ和NdeⅠXhoⅠ和NdeⅠ的酶切位點，確保 啟動子不會被切斷、避免目的基因自身環(huán)化、避免載體自身環(huán)化、避免啟動子反向連接到載體上啟動子不會被切斷、避免目的基因自身環(huán)化、避免載體自身環(huán)化、避免啟動子反向連接到載體上，并啟動 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄過程。
【答案】液體；梯度稀釋；抑菌圈；篩選；LG-13；誘變育種或基因工程；XhoⅠ和NdeⅠ；啟動子不會被切斷、避免目的基因自身環(huán)化、避免載體自身環(huán)化、避免啟動子反向連接到載體上；轉(zhuǎn)錄
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/8 8:0:10組卷：5引用：2難度：0.6
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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