甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因導入甲醇酵母菌中 并成功表達?;卮鹣铝袉栴}。
(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有 從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取、人工合成人工合成(答出兩種)。
(2)要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達,需要先構建基因表達載體而不是直接將基因導入受體細胞,原因是 目的基因無表達所需的啟動子目的基因無表達所需的啟動子和 目的基因無復制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在目的基因無復制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在。
(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質并分泌到細胞外,但自身蛋白質分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點的優(yōu)點在于 便于目的蛋白的分離和純化便于目的蛋白的分離和純化,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結構與人的幾乎完全相同,從細胞結構的角度分析,其原因可能是 甲醉酵母菌有內質網(wǎng)和高爾基體甲醉酵母菌有內質網(wǎng)和高爾基體。
(4)在構建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質粒,使目的基因和質粒獲得不同的黏性末端,其目的是 防止目的基因和質粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質粒反向連接防止目的基因和質粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質粒反向連接。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫中獲?。蝗斯ず铣?;目的基因無表達所需的啟動子;目的基因無復制原點目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在;便于目的蛋白的分離和純化;甲醉酵母菌有內質網(wǎng)和高爾基體;防止目的基因和質粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質粒反向連接
【解答】
【點評】
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